# ご提供いただくもの
哺乳細胞への遺伝子導入を目的とした、バキュロウイルスを作製します。

バキュロウイルスの高い感染力を生かし、一過性でのアッセイ用細胞の作製、モデル細胞群の構築、安定発現細胞株の取得が難しい遺伝子の導入などに適しています。

1.目的遺伝子を保有したプラスミド （量はお問合せ下さい）

2.目的遺伝子の配列情報


# ご提供いただくもの
Invitrogen™ ViraPower™ レンチウイルス発現システムを用いて、目的遺伝子を発現するレンチウイルスストック液を作製します。哺乳類細胞での長期発現を目的とし、遺伝子導入の難しい非増殖系細胞、神経細胞、初代腫瘍細胞、接触障害のある細胞などに適しています。

1.目的の遺伝子を保有した弊社レンチウイルス発現ベクター（100 µg以上）

なお人工遺伝子合成等での構築から承ることも可能です


# ご注文方法
下記の内容を、コスモ・バイオ 営業部までお問い合せください。

標的遺伝子情報（生物種（哺乳類のみ対応）、遺伝子名、RefSeqアクセッション番号） 

遺伝子ごとのshRNA 構築数：1～100 構築（1 遺伝子あたり3 種類以上のshRNA 構築を行うことをCLT 社では推奨 

図1よりクローニングベクターのカスタマイズのご希望

選択マーカー：シングルもしくはダブルマーカー

(GFP、RFP、Puro®、Bleo®など)

マーカー用プロモーター：UbiC、EF1、PGK、CMVなど

shRNA用プロモーター：H1、U6

shRNA発現形態：Tet-制御、定常発現

shRNAカセット：バーコード化shRNA

（プール型shRNAライブラリーへコントロールとして加える場合に有用）

各shRNAはCellecta社独自のアルゴリズムを用いてデザイン致します。shRNAオリゴを合成後、お客様ご希望のベクターへ挿入し、Q.C.（シークエンス解析）を行います。偽ウイルス粒子へのパッケージングもオプションにて承ります。プラスミドまたはパッケージ済みレンチウイルス粒子（プラスミドを含む）を96ウェルプレートまたはチューブに分注してご提供致します。

見積価格および納期は、お選び頂いたオプションやプロジェクトの詳細により異なりますのでご了承ください。


# 概要
SignaGen社shRNA/miRNA ウイルス作製サービスでは、標的のノックダウンに有用なshRNA配列の獲得及びベクターの構築から独自技術による高タイターAAV/AdV作製まで、ノックダウン用AAV/AdV作製を幅広くサポートします。

CRISPR-Cas9によるノックアウト用AAV/AdV作製も可能です。詳細はページ下部の創薬・受託サービス部までお問い合わせください。

■shRNA バリデーションサービス

標的遺伝子に対して80%以上のノックダウン効率を示すshRNA配列を獲得するサービスです。

■shRNA ウイルス作製受託サービス

shRNAのデザインからベクターの構築、ウイルスのパッケージングまで行うサービスです。

■shRNA/miRNA ウイルスパッケージングサービス

お送り頂いたshRNA/miRNA発現用のCis-plasmidまたはアデノウイルスベクターを使用し、ウイルスのパッケージングを行うサービスです。


# 概要
SignaGen 社が開発した Ad.MAX™ システムは遺伝子改変したアデノウイルスパーケージング細胞（Ad.MAX™ 293細胞）とウイルスゲノム中のトランス・エレメントから構成されています。この画期的なシステムは目的遺伝子の発現を保証し、アデノウイルス産生の最大化と適切な遺伝子導入を可能にします。

■Ad.MAX™ システムとは？

Ad.MAX™ システムは遺伝子改変したウイルスパッケージング細胞 HEK293 とアデノウイルス産生を最大化するためのアデノウイルスシャトルベクター、またはアデノウイルゲノムにより構成されています。この技術のコアは改変された HEK293細胞において、ウイルス蛋白発現カセットは強く抑制される一方、アデノウイルスの複製能はそのまま維持されていることです。HEK293細胞の抑制カセットを認識するアデノウイルスゲノムのトランス・エレメントとの組み合わせにより、Ad.MAX™ システムは最小限のタンパク質発現でアデノウイルス産生を最大化します。本システムではアデノウイルスのパッケージング時にHEK293細胞に細胞死を引き起こすような毒性遺伝子をもつアデノウイルスベクターのパッケージングに非常に有効です。


# 概要
SignaGen社AAV作製サービスでは、Cis-plasmidの構築から独自技術による高タイターのAAVパッケージングまで、AAVを使用した研究を幅広くサポートします。

■AAV作製サービス

Cis-plasmidの構築からAAVのパッケージングまでを行います。

・作業内容

Cis-plasmidの構築と調整

AAVへのパッケージングと2×CsCl超遠心によるAAVの精製

qPCRによるAAVのタイトレーション

■AAVパッケージングサービス

お送り頂いたCis-plasmidを使用してAAVのパッケージングを行います。

・作業内容

お送り頂いたCis-plasmidのAAVへのパッケージングと2×CsCl超遠心によるAAVの精製

qPCRによるAAVのタイトレーション

AAVの作製容量に応じて以下の3種類のスケールで対応しております。


# 概要
バキュロウイルスは異種遺伝子を発現させるために使用されるヘルパー非依存性ウイルス系です。バキュロウイルス発現ベクターシステム（BEVS）は、広範な宿主に効率的に感染する能力と、導入遺伝子の高発現を実現する能力のために、ほとんどの細胞において長期遺伝子発現を確立できることが知られております。ポリヘドリンおよびp10は、バキュロウイルスの培養に必須ではない遺伝子と考えられており、導入したい遺伝子配列と置換することが可能です。また、細菌発現系と比較して、昆虫細胞で産生された組換えタンパク質の翻訳後プロセシングおよびフォールディングは哺乳類のプロセスにより類似しており、機能性タンパク質の収量ははるかに大きいです。この技術とウイルスパッケージングの専門知識を組み合わせることにより、APB社はバキュロウイルスサブクローニングとウイルス産生サービスをご提供し、昆虫細胞での高レベル遺伝子発現を可能にします。


# 概要
レトロウイルスは、非常に広範囲の分裂哺乳類細胞において安定した遺伝子発現を実現することのできる効率的なツールです。目的遺伝子をご送付いただくか、ヒト、マウス、およびラット遺伝子の広範なライブラリーからORFベクター をご購入いただき、レトロウイルスを作製することも可能です。レトロウイルスベクターは、タグなし、HAタグ、またはGFPタグをご選択いただけます。


# 概要
■レンチウィルス作製サービス

レンチウィルスベクターの構築からウィルスのパッケージングまでを行います。

・作業内容

レンチウィルスベクターの構築

LentiMAXパッケージングシステムによるレンチウィルス作成

超遠心・PEG沈降によるレンチウィルスの精製

p24 ELISAによるレンチウィルスのタイトレーション

■レンチウィルスパッケージングサービス

構築済みのレンチウィルスベクターをメーカーに送付し、レンチウィルスへのパッケージングを行うサービスです。

・作業内容

LentiMAXパッケージングシステムによるレンチウィルス作成

超遠心・PEG沈降によるレンチウィルスの精製

p24 ELISAによるレンチウィルスのタイトレーション


# 概要
単純ヘルペスウイルス（HSV）は感覚ニューロンの神経節に潜伏し、ヒト宿主において生涯にわたる感染を確立することができる向神経性ウイルスです。その広い宿主範囲、効率的な感染、長期間の持続性、大きな外来DNAの収容能、および有糸分裂後の細胞に遺伝子を送達する能力のために、HSVはほとんどの細胞で長期遺伝子発現を確立することが可能であり、他のシステムでは低効率である神経細胞において特に有用です。ヘルパーフリーおよびアンプリコンHSVベクターは、1つまたは複数の必須ウイルス遺伝子に欠失を有しており、他の非必須ウイルス遺伝子を置換することによって導入遺伝子を発現させるためにご使用可能です。この技術とウイルスパッケージングの専門知識を組み合わせることで、APB 社はカスタムHSV-1ウイルスサブクローニングとウイルス作製サービスを提供し、宿主細胞で高レベルの遺伝子発現を可能にします。


受託カタログ

ウイルス作製サービス一覧